BMJ Best Practice

检查

检查
结果

全血细胞计数

检查

贫血:在冈比亚型人类非洲锥虫病 (HAT) 中为轻度(女性的血红蛋白为 100-119 g/L [10.0-11.9 g/dL],男性为 100-129 g/L [10.0-12.9 g/dL]);罗得西亚型人类非洲锥虫病中为重度 (<80 g/L [8.0 g/dL])。

血小板减少症:在冈比亚型人类非洲锥虫病中为轻度(血小板:100-150×109/L [100,000-150,000/µL]);在罗得西亚型人类非洲锥虫病中可能为重度(血小板:<50×109/L [50,000/µL])。

中度白细胞增多症(WBC 为 12-25×10^9/L [12,000-25,000/µL])。

结果

贫血、血小板减少症和中度白细胞增多症

红细胞沉降率

检查

尚不能确诊,但通常在感染患者中升高。

结果

升高(>20mm/h)

血清免疫球蛋白

检查

无法确诊,但是血清IgM 水平升高表示需要进行寄生虫学检查。[32][69][70][71][72][73]

结果

IgM 升高(升高 5~16 倍),IgG 升高(升高 1.5 倍),IgA 正常或略微升高

锥虫病卡片凝集试验(CATT)

检查

用于检测冈比亚锥虫病特异性抗体的简单快速 10 分钟试验。[74]

敏感性高达 83~98%。 假阴性可能归因于前区(凝集反应的抗体过量),或者感染寄生虫(喀麦隆的一些疫源地可见)的锥虫病卡片凝集试验抗原(LiTat 1.3)基因缺乏。[75]

敏感性约为 95%,但是当流行率小于 2% 时,阳性预测值有限。 假阳性可能归因于其他寄生虫感染。

阳性表示患病,但是应进行进一步的寄生虫学检查,以便确诊。

抗体可能会在治愈 5 年之后出现。[76][77] 相反,抗体水平正常并不意味着已经治愈。[78] 因此,锥虫病卡片凝集试验对于监测治疗反应无用。

不适用于诊断罗得西亚锥虫病。

结果

全血抗体阳性;血清或血浆抗体阳性,稀释比例达 1:4 或更高。

快速诊断化验

检查

用于检测冈比亚锥虫病特异性抗体的简单快速的 15 分钟单项试验。敏感性高达 89-99%,特异性高达 88-99%,具体取决于试验、标本和地区。[50][51][52][79]

阳性表示患病,但是应进行进一步的寄生虫学检查,以便确诊。

可能不适用于监测治疗反应。

不适用于罗得西亚锥虫病的诊断。

结果

血液内存在锥虫特异性抗体

免疫荧光

检查

对于冈比亚锥虫病:敏感性可达 75%-95%。[80][81]

对于罗得西亚锥虫病:敏感性可达 71%-92%。[82][83][84]

特异性>90%。 阳性表示患病,但是应进行进一步的寄生虫学检查,以便确诊。

结果

血清或血浆稀释抗体阳性

酶联免疫吸附法 (ELISA)

检查

敏感性高达 95-100%;特异性高达 97-100%。[85][86][87][88]

阳性表示患病,但是应进行进一步的寄生虫学检查,以便确诊。

结果

血清、血浆或唾液抗体阳性

硬下疳抽取物显微镜检查

检查

诊断锥虫感染的最早方法。 发现锥虫即可确诊患病。

特别适用于诊断罗得西亚锥虫感染。

冈比亚锥虫病患者出现硬下疳的情况较为罕见。

结果

包含锥鞭毛体的新鲜或着色制备品

淋巴结抽取物显微镜检查

检查

特别适用于诊断冈比亚锥虫感染。发现锥虫即可确诊患病。敏感性可达到 40%-80%。

罗得西亚锥虫病患者出现颈部淋巴结重大的情况较为罕见。

结果

包含锥鞭毛体的新鲜或着色制备品

血液显微镜检查

检查

发现锥虫即可确诊患病。新鲜制备或染色的薄血膜的敏感度不足以诊断冈比亚锥虫感染,原因在于检测限值大约仅为 6000-10,000 个锥虫/mL。

厚血膜的检测界限值为 600-5000 个锥虫/mL,因此,冈比亚锥虫病的敏感性有限,为 30-40%。[53][54] 由于寄生虫血症发病率较高,因此,通常可以使用这些技术发现罗得西亚锥虫感染。对于冈比亚锥虫感染的诊断,由于寄生虫血症发病率通常较低,首选浓集方法进行检测。可以在吉姆萨染色的血液厚涂片中看见布氏锥虫[Figure caption and citation for the preceding image starts]: 可以在吉姆萨染色的血液厚涂片中看见布氏锥虫(图片)由 V. Lejon 医生提供 [Citation ends].

结果

包含锥鞭毛体的新鲜或着色制备品

微量血球容量计分离技术

检查

检测限值为 500-600 锥虫/mL 的富集技术。[89] 发现锥虫即可确诊患病。特别适用于冈比亚锥虫病检测,敏感性约为 50-60%。[53][54]

敏感性随检测的毛细血管数量(至少 2 个)的增多而提高。

缺乏经验的读者可能难以认出锥虫。

结果

血沉棕黄层内部和顶部可见活动的锥虫

定量血沉棕黄层技术

检查

检测限值为 15-300 锥虫/mL 的富集技术。[90] 发现锥虫即可确诊患病。特别适用于诊断冈比亚锥虫感染。结合微型阴离子交换离心技术使用,作为最佳试验,敏感性可达 80%-90%。[91]

结果

活动的锥虫伴扩大性血沉棕黄层内白细胞之间的荧光动基体和细胞核

微型阴离子交换分离技术(mAECT)

检查

检测限值为 15-100 锥虫/mL 的富集技术。[92][93] 发现锥虫即可确诊患病。

特别适用于诊断冈比亚锥虫感染。最佳试验,敏感性约为 75-85%。[53][54] 采用白膜法将更大量血液样本通过离子交换柱时,敏感性可以提高到 91%-96%。[55][56]

应选取注射肝素的血液;应避免使用 EDTA,因为这可能会干扰红细胞和凝胶的结合。 使用富集的血沉棕黄层可能提高敏感度。[55]

微型阴离子交换分离技术仅可从刚果民主共和国和科特迪瓦的生产经营单位获得,因此仅限专门从事人类非洲锥虫病诊治的健康管理结构使用。

结果

色谱柱内活动的锥虫通过


需要考虑的检查

检查
结果

心电图

检查

与冈比亚锥虫病相比,心动过速、心肌炎、心包炎和充血性心力衰竭在罗得西亚锥虫病中出现的更早,且更严重。[67][68]

结果

复极变化、低电压、QTC 间期延长

脑脊液 (CSF) 白细胞计数

检查

一旦在其他体液内发现寄生虫,或高度警惕怀疑患有人类非洲锥虫病(HAT)(如锥虫病卡片凝集试验(CATT)最终滴定度升高和/或神经系统症状),则应进行脑脊液检测,以确定疾病分期。

在某些国家/地区,WBC 高达 0.02×109/L (20/µL) 但无神经系统症状的冈比亚锥虫病患者也被按照疾病早期阶段进行处理。

脑脊液白细胞计数大于 1×10^9/L(1000/µL)的病例较为罕见。

脑脊液细胞增多主要包括 B-淋巴细胞(CD19+)。[94]

莫特桑葚细胞是带有含IgM 的大囊泡的血浆细胞,但凡存在莫特桑葚细胞,即表示患有晚期人类非洲锥虫病。[48]

结果

早期:WBC≤0.005×10^9/L(≤5/µL),且未见锥虫;晚期:WBC>0.005×10^9/L(>5/µL)

脑脊液显微镜检查

检查

简单技术(新鲜或着色制备品)的敏感性非常有限。 建议使用脑脊液富集技术,该技术特别适用于治疗效果评估。 发现锥虫即可确诊为晚期疾病。

结果

晚期疾病可见锥虫

脑脊液二次分离

检查

脑脊液富集技术。[95] 敏感性随分离的脑脊液容量增多而提高。 发现锥虫即可确诊为晚期疾病。

结果

晚期疾病的毛细血管底部内 WBC 沉积之间有锥虫

改良的脑脊液单次分离

检查

脑脊液富集技术。[92][96][97] 敏感性随分离的脑脊液容量增多而提高。 发现锥虫即可确诊为晚期疾病。

结果

晚期疾病的 WBC 沉积之间的菌管顶部有锥虫

CSF 蛋白

检查

早期已经升高,因此不再建议用于疾病分期。[98]

结果

轻度升高


检查
结果

聚合酶链反应 (PCR)

检查

大多数针对锥虫亚属的引物具有特异性并且源于卫星序列或多拷贝基因,检测限值为 1-40 个锥虫/mL ,且敏感性较高。[99][100][101][102] 诊断特异性达到 97% 或以上,但这些聚合酶链反应无法区分冈比亚锥虫和罗得西亚锥虫感染,并且阳性反应可能与布氏锥虫、伊氏锥虫和马疫锥虫有关。

冈比亚锥虫和罗得西亚锥虫感染之间的差异可以通过使用适用于罗得西亚锥虫病的抗血清相关基因 (serum resistance-associated gene, SRA) 检测,[103][104][105] 以及可使用冈比亚锥虫病特异性糖蛋白 (TgsGP) 基因检测进行冈比亚锥虫病的检测。[105][106] 这些单拷贝基因检测的敏感性较低。当前缺乏标准化和比较研究。脑脊液聚合酶链反应阳性的分期显著性依然不明。[107]对于治疗结局的评估,经证明 PCR 是不可靠的。[108][109][110]

更新的分子技术包括环介导等温扩增 (loop-mediated isothermal amplification, LAMP)、依赖核酸序列扩增 (NASBA)、寡核苷酸色谱分析法和逆转录酶实时聚合酶链反应,可用于检测锥虫亚属特异性剪接前导序列 RNA,[102][111][112][113][114][115][116][117] 但需要适当的标准化和验证。[118][119][120] 在首次评估冈比亚锥虫型人类非洲锥虫病的临床样本时,Loopamp 布氏锥虫检测试剂盒 (Loopamp Trypanosoma brucei Detection Kit)(品牌名称)的检测效果(根据锥虫亚属重复插入可移动 DNA 元件的检测结果)与常规聚合酶链反应相似。[121]

聚合酶链反应或环介导等温扩增反应阳性表示患有人类非洲锥虫病,但是应进行进一步的寄生虫学检查,以便确诊。

结果

锥虫 DNA

鞘内免疫球蛋白生产

检查

处于冈比亚锥虫病晚期阶段的患者的脑脊液中常见 IgM 浓度偏高 (>100 mg/L)。[32]

鞘内 IgM 计数显示为 IgM 为主的免疫反应模式。[32][33] 寡克隆 IgG 的检测结果可能呈阴性。[122] 阳性表示晚期疾病,但应进行进一步的寄生虫学检查,以便确诊。

结果

鞘内 IgM 生产

分期生物标志物

检查

正在研究将各种脑脊液蛋白质和细胞免疫系统活化的标志物作为分期和治疗效果评估的标志物。 初步结果看起来前景喜人。[62][63][64]

结果

早期标志物阳性表示早期疾病,晚期标志物阳性表示晚期疾病

免疫溶锥虫

检查

可以使用人类血清或血浆培养活的冈比亚锥虫。该试验仅可由高度专业化的实验室进行。[60][61] 免疫溶锥虫试验的特异性被认为可达 100%,免疫溶锥虫试验结果呈阳性表明患者接触过冈比亚锥虫。

结果

如果试验样本包含冈比亚锥虫特异性抗体,寄生虫则会被抗体介导的补体溶菌作用杀死

脑部 MRI 扫描

检查

在人类非洲锥虫病诊断中未起到任何作用。 成功治愈后发生异常的情况依然存在。[59]

结果

脑膜增厚以及幕上白质、脑干和小脑的双侧融合性超密集 T2 信号

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